期刊简介
本杂志是由青岛大学医学院与青岛大学医学院附属医院联合主办，国内外公开发行的省级综合性学术期刊。本刊坚持理论与实践、普及与提高相结合的方针，报道基础医学、临床医学、预防医学、康复医学和祖国医学等学科领域的先进科研成果和临床诊疗经验。
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首页>齐鲁医学杂志
- 杂志名称：齐鲁医学杂志
- 主管单位：山东省教育厅
- 主办单位：青岛大学医学院
- 国际刊号：1008-0341
- 国内刊号：37-1280/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
重组分泌型TRAIL腺病毒载体的构建及鉴定
王衍刚；窦以河；刘世海；姚如永；隋爱华；刘相萍
关键词：TNF相关凋亡诱导配体, 重组腺病毒, 聚合酶链反应
摘要：目的 构建表达分泌型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体( TRAIL)基因的重组腺病毒载体.方法 采用PCR技术从人肝脏cDNA文库中扩增出编码114～281位氨基酸的TRAIL基因片段.将扩增的TRAIL插入含有分泌性信号肽IL-2的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-IL-2中,将其命名为pAdTrack-CMV-IL-2-TRAIL.pAdTrack-CMV-IL-2-TRAIL经Pme Ⅰ线性化后,电转化入转化了pAdEasy-1的BJ5183细胞.筛选重组腺病毒质粒pAd-sTRAIL.经HEK293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒Ad-sTRAIL,氯化铯密度梯度离心纯化AdsTRAIL病毒,并测定病毒滴度.采用RT-PCR法和免疫荧光技术分别检测目的基因的表达.结果 纯化后的Ad-TRAIL病毒滴度为3.12×1015 pfu/L.经RT-PCR扩增出长104 bp的基因片段.免疫荧光检测到了目的基因在U251细胞的高效表达.结论 成功构建了重组分泌型TRAIL腺病毒载体,为下一步应用于脑肿瘤的基因治疗打下了基础.
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