期刊简介

               本杂志是由青岛大学医学院与青岛大学医学院附属医院联合主办,国内外公开发行的省级综合性学术期刊。本刊坚持理论与实践、普及与提高相结合的方针,报道基础医学、临床医学、预防医学、康复医学和祖国医学等学科领域的先进科研成果和临床诊疗经验。                

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  • 杂志名称:齐鲁医学杂志
  • 主管单位:山东省教育厅
  • 主办单位:青岛大学医学院
  • 国际刊号:1008-0341
  • 国内刊号:37-1280/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
齐鲁医学杂志2004年第04期

PAX-2基因的克隆化和在原核细胞中的表达

隋爱华;刘相萍;杨堃;李延江;吕振华

关键词:PAX-2基因, 原核表达, 聚合酶链反应
摘要:①目的以RT-PCR技术克隆PAX-2全长开放读框,构建重组原核表达载体,制备重组人PAX-2蛋白,为肾肿瘤免疫治疗打下基础.②方法从肾癌手术标本中分离mRNA,RT-PCR扩增筛选PAX-2全长开放读框,扩增产物经过限制性酶切分析及DNA测序后,克隆入高效原核表达质粒pTrcHis,构建重组载体,转化工程菌株JM109,经IPTG诱导表达及6×His配体亲和层析制备原核表达重组人PAX-2蛋白.③结果 RT-PCR扩增获得约1.2 kb大小的产物,经限制性酶切分析和DNA测序,证实为人PAX-2基因的完整开放读框.④结论肿瘤组织总RNA经RT-PCR一步法能够对PAX-2基因的开放读框进行完整有效的筛选.经重组技术及高效原核系统制备重组人PAX-2蛋白的效率和纯度满意.体外制备的重组人PAX-2蛋白对肾肿瘤特异性抗原的瘤苗制备和免疫治疗具有重要价值.